Aflatoxicoses: prejuízos causados ao desempenho zootécnico de frangos de corte, boas práticas agrícolas e métodos biológicos de detoxicação / Aflatoxicosis: losses in poultry performance, agricultural good practices and biological methods of detoxification

As aflatoxicoses são micotoxicoses causadas por toxinas produzidas por estirpes de fungos do gênero Aspergillus. Cau- sam prejuízos importantes à produção animal, em especial àquelas que têm nos grãos sua matéria-prima base para preparação de ração, como a avicultura de corte. Atualmente, diversas técnicas, tais como uso de substâncias químicas, métodos físicos, estratégias de colheita, armazenagem e processamento de alimentos, estão sendo estudadas para quese diminua e, se bem aplicadas, evite os efeitos deletérios causados por essas substâncias à saúde animal. O objetivo desta revisão é descrever os principais efeitos das aflatoxinas sobre o desempenho zootécnico na produção de frangos de corte, as alterações nas matérias-primas de ração e os avanços científicos em metodologias de detoxificação biológica e de boas práticas agrícolas.

Aflatoxicosis are mycotoxicosis caused by toxins produced by strains of fungi of the genus Aspergillus. They cause important losses to animal production, especially to those that use grains like base raw-material to prepare feeds, like poultry production. Currently, many techniques are being studied to prevent the deleterious effects caused by these substances to animal health, including the use of chemical substances, physical methods, strategies for harvest, storage and processing food. The objective of this review is to describe the main effects of aflatoxins on poultry performance, the alterations in raw-materials of feeds and scientific advances on methods for biological detoxification and agricultural good practices.

Ações de vigilância para influenza aviária desenvolvida no Brasil, no período de 2004 e 2007 / Avian influenza surveillance activities, developed in Brazil from 2004 to 2007

No início dos anos 2000, o Brasil se consolidou como maior exportador mundial de carne de frango, mesmo período em que se observou a emergência global de focos de HPAI. Para assegurar a qualidade sanitária do produto avícola nacional, o Mapa organizou um programa oficial de vigilância para o vírus de IA. Na primeira fase, foram coletados 106.226 soros e 7.017 pools de suabes traqueais e cloacais, provenientes de granjas avícolas de produção comercial intensiva de frangos de corte, no período entre janeiro de 2004 e março de 2005. Não se obteve isolamento viral para IA, porém foi identificado um conglomerado epidemiológico de 24 municípios, delineado pela interpolação de dados relacionados às localizações geográficas, e os resultados sorológicos das amostras dessas origens, ELISA reagente para IA, no estado de Rondônia. Na segunda fase da vigilância, três distintas ações para pesquisa do vírus de IA foram executadas entre 2006 e 2007, em: 1) aves comerciais de corte de criação intensiva; 2) aves de reprodução; e 3) aves migratórias e de subsistência. Não houve identificação de resposta sorológica ou isolamento de vírus de IA em aves dos grupos 1 e 2. Foram isolados vírus de IA do subtipo H3 em aves migratórias, capturadas nos estados de Pará e Pernambuco. Também foram identificados vírus de IA dos subtipos H2, H3 e H4 em aves de subsistência, de propriedades localizadas no Amazonas, Pará, Pernambuco, Rio Grande do Sul e Santa Catarina. Observou-se risco sanitário para LPAI associado às populações de aves silvestres e de subsistência localizadas em áreas próximas ao sistema comercial. Estudos adicionais serão necessários para se avaliar o risco associado à introdução de IA no sistema comercial avícola brasileiro.

In the early 2000s Brazil had established itself as the world's largest exporter of poultry meat, the same period in which the emergence of HPAI global outbreaks was observed. To ensure the national health quality of Brazilian poultry product, MAPA organized an official AI surveillance program. In the first stage, during the period between January 2004 and March 2005, 106.226 sera were collected and 7.017 tracheal and cloacae pools of swabs were obtained from intensive commercial broiler farms. No AI virus isolation was obtained, however, an epidemiological cluster was identified in the state of Rondonia, outlined by the interpolation of data related to municipalities' geographic location and serological response to AI in ELISA tests. Between 2006 and 2007, during the second stage, three AI surveillance actions were executed in: 1) intensive commercial broiler farms, 2) breeding farms and 3) migratory and backyard birds. There was neither serological response identification nor IA virus isolation in birds belonging to groups 1 and 2. H3 LPAI subtype viruses were isolated from migratory birds captured in the states of Pará and Pernambuco. H2, H3 and H4 LPAI subtypes were also identified in backyard birds from samples collected in the states of Amazonas, Pará, Pernambuco, Rio Grande do Sul and Santa Catarina. There are health risks to LPAI associated to wild and backyard bird populations located in areas close to commercial farms. Additional studies are needed for risk assessment regarding the possibility of AI introduction in the Brazilian commercial poultry system.

Detection of Salmonella spp, Salmonella Enteritidis and Typhimurium in naturally infected broiler chickens by a multiplex PCR-based assay

The presence of Salmonella in the intestinal tract, on the chickens skin and among their feathers, may cause carcasses contamination during slaughtering and processing and possibly it is responsible by the introduction of this microorganism in the slaughterhouses. A rapid method to identify and monitor Salmonella and their sorovars in farm is becoming necessary. A pre-enriched multiplex polymerase chain reaction (m-PCR) assay employing specific primers was developed and used to detect Salmonella at the genus level and to identify the Salmonella enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) and Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium) in broiler chicken swab samples. The method was validated by testing DNA extract from 90 fresh culture cloacal swab samples from poultry chicken cultured in phosphate buffer peptone water at 37 ºC for 18 h. The final results showed the presence of Salmonella spp. in 25% of samples, S. Enteritidis was present in 12% of the Salmonella-positive samples and S. Typhimurium in 3% of the samples. The m-PCR assay developed in this study is a specific and rapid alternative method for the identification of Salmonella spp. and allowed the observation of specific serovar contamination in the field conditions within the locations where these chickens are typically raised.

Development and evaluation of a novel subunit vaccine for Mycoplasma gallisepticum / Desenvolvimento e avaliação de uma nova vacina para Mycoplasma gallisepticum

Adhesion proteins from Mycoplasma gallisepticum (MG) encoded by cytadhesion genes mgc1 and mgc2 were cloned into plasmid vectors and transformed into E. coli. Seventeen groups of specific-pathogen free (SPF), birds at four weeks of age were used to inoculate these two proteins (MGC1 and MGC2) mixed into an oil emulsion creating a novel MG vaccine. Six different protein concentrations (50, 100, 200, 400, 800, and 1000µg/bird) were tested with two equal concentration doses at four and seven weeks of age. In addition, many control groups were needed such as bacterin, membrane, no vaccine or challenge, oil emulsion alone, and no vaccine but challenged. Three weeks following the second vaccination, 50% of the birds in each treatment group were challenged with MG strain S6. The remaining birds were left as contacts to verify protection against horizontal transmission. All birds were bled before vaccinations, challenge and euthanasia. Birds were negative for MG at the first vaccination, as shown by serum plate agglutination test. At necropsy, tissue samples (trachea, lungs, and air sacs) were collected for histopathological examination. Swabs from trachea were used for PCR analysis. ELISA results showed a strong immune response to both protein preparations and almost the same response level for different doses tested, proving the immunogenic features of MGC1 and MGC2. However, humoral responses failed to prevent MG infection and disease when challenged as demonstrated by PCR and histopathology. MGC1 contact birds showed some degree of infection by PCR analysis. In addition, histopathological and ELISA results suggest that contact birds did not have enough time to develop lesions and to mount an immune response.

Os genes mgc1 e mgc2, codificadores de duas proteínas de adesão (MGC1 e MGC2) da bactéria Mycoplasma gallisepticum, foram clonados em E. coli. Dezessete grupos de aves livres de patógenos específicos (SPF), com quatro semanas de idade, foram inoculados com uma emulsão oleosa contendo as proteínas MGC1 e MGC2 purificadas. Seis concentrações (50, 100, 200, 400, 800, e 1000µg/ave) foram testadas com duas doses idênticas, às quatro e sete semanas de vida, respectivamente. Além disso, grupos controles foram avaliados com uma vacina comercial contra micoplasmose aviária, membrana de MG, grupo sem vacina/sem desafio, grupo vacina oleosa de MGC1 sem desafio, grupo com vacina oleosa de MGC2 sem desafio, grupo desafiado mas sem vacina. Três semanas após a segunda e a última vacinação, 50% dos animais dos grupos tratamentos foram desafiados com a cepa S6 de MG. O restante dos animais foi deixado como contato para averiguar proteção contra a transmissão horizontal da doença. Amostras de sangue de todas as aves foram coletadas antes das vacinações, do desafio e da eutanásia. As aves eram negativas para MG às quatro semanas de vida, conforme visto na aglutinação em placa. Na necropsia, tecidos (traqueia, pulmão e sacos aéreos) foram coletados para exame histopatológico. Suabes da traqueia foram utilizados para a PCR. Os resultados do ELISA demonstraram forte resposta imune contra as duas proteínas testadas e resposta similar independentemente do número de doses, provando a sua capacidade imunogênica. Porém, esta resposta humoral gerada foi incapaz de prevenir a infecção e a doença após desafio, conforme demonstrado pelos exames PCR e histopatológico. Aves-contato, inoculadas com MGC1, demonstraram estar infectadas nas análises de PCR. Além disso, os resultados do histopatológico e ELISA sugerem que os animais-contato não tiveram tempo suficiente para demonstrar lesões ou resposta imune.

Deficiência de riboflavina em frangos de corte (Gallus gallus) - relato de caso / Riboflavin deficiency in broiler chickens (Gallus gallus) - a case report / Deficiencia de riboflavina en pollos de engorde (Gallus gallus) - relato de caso

Os micronutrientes executam funções bioquímicas específicas nos seres vivos, algumas das quais são fundamentais à vida. Dentre os micronutrientes, as vitaminas merecem atenção por participarem como cofatores de reações metabólicas e permitirem maior eficiência dos sistemas de síntese no organismo animal. Em meio às vitaminas, a riboflavina apresenta algumas particularidades, especialmente para aves, por ser provavelmente a vitamina mais limitante nesta espécie. A riboflavina está envolvida no metabolismo de carboidratos, gorduras e proteínas, apresentando papel preponderante na cadeia transportadora de elétrons, no processo de respiração celular e no processo de obtenção de energia por parte da célula, atuando na manutenção da integridade das membranas mucosas, pele, olhos e sistema nervoso. A deficiência de riboflavina resulta em alterações no metabolismo e efeito patológico em vários tecidos, sendo a epiderme e a bainha de mielina dos axônios as mais comprometidas. O principal sinal clínico da deficiência de riboflavina em aves jovens é a paralisia dos dedos curvos. O trabalho tem como objetivo relatar a ocorrência de um caso clínico de deficiência de riboflavina em um lote comercial de frangos de corte (Gallus gallus) alimentado exclusivamente com dieta de origem vegetal, que apresentou paralisia dos dedos curvos aos quatro dias de idade. Após diagnóstico presuntivo, o lote foi suplementado com 2,5mg/Kg de riboflavina via água de bebida, e apresentou melhora significativa horas após o início da suplementação, em que 95% das aves se recuperaram até os doze dias pós suplementação e os 5% restante persistiram com os sinais clínicos até o abate.

Micronutrients perform specific biochemical functions in living organisms, some of which are essential to life. Among the micronutrients, vitamins deserve special attention for participating as cofactors in metabolic reactions and allowing greater efficiency of synthesis systems in an animal organism. In the midst of vitamins, riboflavin presents some particularities, especially for poultry, because it is probably the most limiting vitamin in this species. Riboflavin is involved in the metabolism of carbohydrates, fats and proteins, presenting key role in the electron transport chain, the process of cellular respiration and in the process of obtaining energy from the cell, acting in the maintenance of the integrity of mucous membranes, skin, eyes and nervous system. Riboflavin deficiency results in changes in metabolism and pathological effect in various tissues in which the epidermis and the myelin sheath of axons are the most involved. The main clinical sign of riboflavin deficiency in young poultry is the curled toe paralysis. This paper aims to report the occurrence of a clinical case of riboflavin deficiency in a batch of commercial broiler chickens (Gallus gallus) fed exclusively with vegetable diet that had curled toe paralysis at four days of age. Following presumptive diagnosis, the batch was supplemented with 2.5 mg/kg of riboflavin in drinking water, and showed significant improvement some hours after the beginning of supplementation; 95% of the poultry recovered up to twelve days after supplementation and the remaining 5% had persistent clinical signs until slaughter.

Los micronutrientes desempeñan funciones bioquímicas específicas en los seres vivos, algunas de las cuales son fundamentales a la vida. Entre los micronutrientes, las vitaminas merecen atención por participaren como cofactores de reacciones metabólicas y permiten mayor eficiencia de los sistemas de síntesis en el organismo animal. Entre las vitaminas,nla riboflavina presenta algunas peculiaridades, especialmente para las aves, siendo probablemente la vitamina más limitanteb en esta especie. La riboflavina está implicada en el metabolismo de carbohidratos, grasas y proteínas, presentando papel importanteen la cadena de transporte de electrones, en el proceso de respiración celular y en el proceso de obtención de energía de la célula, actuando en el mantenimiento de la integridad de las membranas mucosas, piel, ojos y sistema nervioso. La deficiencia de riboflavina resulta en alteraciones en el metabolismo y efecto patológico en varios tejidos, siendo la epidermis y la vaina de mielina de los axones las más comprometidas. La principal señal clínica de la deficiencia de riboflavina en aves jóvenes es la parálisis de los dedos curvados. El estudio tiene como objetivo relatar la ocurrencia de un caso clínico de deficiencia de riboflavina en un lote comercial de pollos de engorde (Gallus gallus), alimentados exclusivamente con dieta de origen vegetal, que mostró parálisis de los dedos curvados en cuatro días de edad. Después del diagnóstico presuntivo, el lote fue suplementado con 2,5 mg / kg de riboflavina vía agua potable, y presentó mejora significativa horas después del inicio de la suplementación, donde 95% de las aves se recuperaron hasta los doce días pos suplementación y los 5% restante persistieron con señales clínicos hasta la matanza.

Virulence potential of filamentous fungi isolated from poultry barns in Cascavel, Paraná, Brazil / Potencial de virulência de fungos filamentosos isolados de celeiros de aves em Cascavel, Paraná, Brasil

Opportunistic fungi are those that normally would not cause diseases in otherwise healthy people, but are able to cause problems under some circumstances, and for this they need to possess a certain virulence potential. The objective of this study was to identify samples of filamentous fungi isolated from poultry barns in Cascavel, Paraná, and also to evaluate their virulence potential by assessing proteinase production, hemolytic activity, urease production, and growth rate at 37 ºC. We have evaluated the following samples: Acremonium hyalinulum (1 sample), Aspergillus sp. (12), Beauveria bassiana (1), Curvularia brachyspora (1), Paecilomyces variotti (1), and Penicillium sp. (2). Out of the 18 samples analyzed, 44.4 percent showed proteolytic activity using albumin as the substrate versus 66.7 percent when using casein; 66.7 percent showed hemolytic activity, 83.3 percent were positive for urea, and 88.9 percent grew at a temperature of 37 ºC. The results demonstrated that the majority of the isolates expressed virulence factors. Therefore, these isolates have the potential to harm human hosts, such as those working at poultry barns, especially predisposed or susceptible individuals.

Fungos oportunistas são aqueles que normalmente não causariam doenças em pessoas saudáveis, mas eles são capazes de causar problemas sob certas circunstâncias e, para isso, eles necessitam possuir algum potencial de virulência. O objetivo deste trabalho foi identificar amostras de fungos filamentosos isolados de granjas de aves em Cascavel, Paraná, e também avaliar o seu potencial de virulência, verificando a produção de proteinase, atividade hemolítica, produção de urease e crescimento a 37 ºC. Foram avaliados Acremonium hyalinulum (01), Aspergillus sp (12), Beauveria bassiana (01), Curvularia brachyspora (01), Paecylomices variotti (01) e Penicillium sp (02). Das 18 amostras, 44,4 por cento apresentaram atividade proteolítica usando como substrato a albumina e 66,7 por cento com caseína; 66,7 por cento demonstraram atividade hemolítica, 83,3 por cento foram uréia positivas e 88,9 por cento cresceram em temperatura de 37 ºC. Os resultados demonstram que a maioria dos isolados expressaram fatores de virulência e, portanto, têm potencial para causar danos a hospedeiros humanos como os trabalhadores dos aviários, sobretudo em indivíduos predispostos ou suscetíveis.

Epidemiological survey on Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae by multiplex PCR in commercial poultry / Investigação epidemiológica de Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae por PCR Multiplex em estabelecimentos comerciais de aves

Mycoplasmas are important avian pathogens, which cause respiratory and joint diseases that result in large economic losses in Brazilian and world-wide poultry industry. This investigation regarding the main species of mycoplasmas, Mycoplasma gallisepticum (MG) and M. synoviae (MS), responsible for the above mentioned conditions, was carried out through PCR Multiplex analysis. One thousand and forty-six (1,046) samples of tracheal swabs and piped embryos were collected from 33 farms with laying hens, breeders, broilers or hatchery, located in the Brazilian states of São Paulo, Paraná and Pernambuco, where respiratory problems or drops in egg production had occurred. The MG and MS prevalence on the farms was 72.7 percent. These results indicated (1) high dissemination of mycoplasmas in the evaluated farms, with predominance of MS, either as single infectious agent or associated with other mycoplasmas in 20 farms (60.6 percent), and (2) an increase of MS and decrease of MG infection in Brazilian commercial poultry.

Os Micoplasmas são importantes patógenos aviários que causam doenças respiratórias e de articulações que resultam em grandes perdas econômicas para a indústria avícola brasileira e mundial. O estudo das principais espécies de Mycoplasma, Mycoplasma gallisepticum (MG) e M. synoviae (MS), responsáveis pelas doenças mencionadas acima, foram analisadas pela técnica de PCR Multiplex. Foram colhidas 1046 amostras de suabe traqueal e embriões bicados de 33 estabelecimentos de aves de postura, matrizes, frangos de corte e um incubatório, localizados nos Estados brasileiros de São Paulo, Paraná e Pernambuco, as quais apresentavam problemas respiratórios ou queda na produção de ovos. A prevalência de MS e MG nas granjas foi de 72,7 por cento. Os resultados indicaram uma alta disseminação de Mycoplasma nas granjas avaliadas, com predominância de MS, como um único agente infeccioso ou associado com outros micoplasmas em 20 granjas (60,6 por cento). Assim, este estudo indicou o aumento da incidência de MS e a redução de MG nas granjas comerciais no Brasil.

Residuos de enrofloxacina en canales de pollos procedentes de cuatro plantas beneficiadoras municipio San Francisco estado Zulia Venezuela / Enrofloxacine residues in carcass of chickens from four slaughterhouse San Francisco municipality Zulia state Venezuela

El estudio se realizó con la finalidad de conocer la realidad actual y local referida al uso de antibióticos a nivel de granjas de pollos de engorde; para ello se elaboró una encuesta epidemiológica (validez de constructo y confiabilidad de alfa cronbach (0,91)) y se indagó la presencia de residuos de antibióticos en tejidos de pollos beneficiados en cuatro plantas del municipio San Francisco del estado Zulia, Venezuela. La medición se efectuó mediante la técnica de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). El muestreo se basó en estimaciones del consumo de pollo por familia y constó de 20 canales obtenidos directamente de las empresas. Los resultados de la encuesta mostraron uso generalizado de antibióticos y preferencia por la enrofloxacina (51 por ciento), por su supuesta doble acción profiláctica (promotor de crecimiento) y terapéutica, por lo que se convirtió en centro de la indagación. Los datos de la medición de residuos evidencian niveles importantes de los metabolitos (enrofloxacina y ciprofloxacina) en dos de las cuatro plantas estudiadas, con diferencias significativas entre ellas (valor F= 174,77; P= 0,05). Dichos datos sugieren el incumplimiento del tiempo de retiro del medicamento, previa salida de las aves a matadero y reaviven la discusión sobre sus efectos adversos en la salud pública de los consumidores.

The study was made with the purpose of knowing present and local reality, referred to the use of antibiotics at level of farms of fattening chickens; for it an epidemiological survey was elaborated (validity of constructo and trustworthiness of alpha cronbach (0.91)) and the presence of weave antibiotic remainders was investigated of chickens benefitted in four plants of the San Francisco County, Zulia State, Venezuela. The measurement took place by means of the technique of liquid chromatography of hi-res (HPLC). The sampling was based on estimations of the consumption of chicken by family and consisted of 20 carcass, obtained directly of the companies. The results of the survey showed the generalized antibiotic use and preference by the enrofloxacin (51%) because of their supposed double prophylactic action (promotional of growth) and therapeutic, reason that became it as center of the investigation. The data about the measurement of remainders demonstrate important levels of the metabolites (enrofloxacin and ciprofloxacin) in two of the four studied plants, with significant differences among them (value F= 174.77; P= 0.05). These data suggest the breach of the time of retirement of medicine previous leaving of the birds to slaughter house and revive the discussion on their adverse effects in the public health of the consumers.

Efeito de diferentes densidades populacionais e do sexo sobre o desempenho e uniformidade em frangos de corte / Effect of different stocking rates and sex on the performance and uniformity of broilers

O experimento teve a finalidade de comparar o desempenho e uniformidade de frangos de corte separados por sexo e criados em diferentes densidades populacionais. Para tanto foram utilizados 1800 pintos de 01 dia da linhagem Ross, distribuídos em 36 parcelas experimentais (Boxes), de acordo com um delineamento experimental tipo blocos ao acaso, obedecendo um modelo fatorial 3x2 com 3 sexos (Machos, Fêmeas e Misto) e duas densidades populacionais (10 e 15 aves/m²), com 6 repetições por tratamento, sendo 40 ou 60 aves por repetição. As rações experimentais foram formuladas à base de milho e farelo de soja. Foram efetuadas medidas semanais de consumo de ração e peso dos animais, e ao final de 45 dias os animais foram abatidos. Ao final do período experimental, os resultados mostraram que os maiores valores de peso, consumo, Conversão Alimentar e Ganho Médio Diário foram verificados na menor taxa de lotação empregada, havendo significância estatística (p<0,05) para os itens: consumo (todos os períodos) e Conversão Alimentar (1-21 e 22-45 dias). Todavia, o incremento na taxa de lotação apresentou maiores viabilidade e uniformidade.Quanto aos sexos empregados, foram observados melhores valores para os machos, havendo diferença significativa (p<0,05) para peso corporal (21 e 45 dias), consumo (22-45 e 1-45 dias), Conversão Alimentar (1-45 dias) e Ganho Médio Diário.

This experiment was developed to compare the performance and uniformity of broilers chickens as related to sex and different stocking rates. 1800 one day Ross breed chicks were distributed in 36 boxes, on a completely randomized block design, 3x2 factorial, with 3 sex (male, female and mixed) and 2 stocking (10 and 15 birds/m²). There were six replications per treatment, with 40 or 60 birds per replication. The experimental ration was formulated with corn and soy bean meal. The results were taken weekly, and after 45 days the animals were slaughtered. The results showed an increase in weight, consumption food, food conversion and daily weight gain in the smaller stocking, with statistical significance (p<0,05) for: food consumption (all period) and food conversion (1-21 and 22-45 days). However, the increase in stocking showed better values in viability and uniformity. With regard the sex, better values were seen for males, with statistical significance (p<0,05) for weight (21 and 45 days), food consumption(22-45 and 1-45 days), food conversion (1-45 days) and daily weight gain.

Effect of cookery and holding on hams and turkey rolls contaminated with Clostridium perfringens.

Canned hams, turkey rolls, and ground-beef casseroles were inoculated with a mixture of vegetative cells and spores of selected strains of Clostridium perfringens, in approximately known numbers. After cooking and holding at different temperatures for various times, samples of the food were plated directly on sulfadiazine-polymixin-sulfite-agar. In all cases, small but measurable percentages of the organisms survived cookery. The number of cells viable after cookery of the ham or turkey was influenced by the position of the slice of meat in the roast as well as by the final temperature to which the product was heated. Plate counts for turkey or beef casserole held at temperatures in the range of 5 to 10 C for 48 hr indicated stabilization of the population or a tendency to decrease. At 24 C, the multiplication of cells was apparent in 4 hr and rapid in 6 hr. When the food was maintained at 68 C, populations remained viable for 6 hr and the counts did not change markedly. In turkey maintained at 37 C, the number of cells increased sharply within 4 hr.